α-葡萄糖苷酶/59920-31-9

中文:α-葡萄糖苷酶
英文:α-GLU
CAS:59920-31-9
分子式:C6H13NO4
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH2002-01
规格:3ku
中文同义词:Alpha-葡萄糖苷酶,α-D-葡萄糖苷酶;α-葡糖苷酶
英文同义词:α-Glucosidase from Saccharomyces cerevisiae;
技术指标

外观: 白色无定型冻干粉末;蛋白纯度: ≥80%; 比活性 : ≥10 U/mg 酶粉; α-淀粉酶: ≤0.00001%

来源:微生物,分类: EC 3.2.1.20; 分子量: 65 kDa(SDS-PAGE); 等电点:5.2; Km 值: 5.8×10-4 M; (p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside); 抑制剂 : SDS,Ag+,Hg2+,Cu2+; 最适pH: 7.1; 最适温度: 50℃; pH稳定性: 6.0-8.0(25℃,16h); 热稳定性: 50℃ 以下稳定(pH 7.0,10 min); 稳定性: -25~-15℃ 静置保存12 个月保持; 90% 以上活性;保护剂: BSA.

用途: 用于α-淀粉酶试剂的研发和大量制备。

酶活定义

单位酶活定义为在下述反应条件下,每分钟生成1μmol PNP所需的酶量。

试剂准备

试剂I:100 mM 磷酸缓冲液,pH 7.0。

试剂II:20 mM 对硝基苯 -α-D-吡喃葡糖苷(用水溶解,可在4℃中保存2周)。试剂III:200 mM Na2CO3(21.2mg/mL 用水溶解)。

试剂IV:200 mM, pH 7.0 磷酸钾缓冲液,含 0.05% Tween 20 和 1 mM EDTA。待测样品:用试剂 IV将酶液稀释至 0.006-0.022 U/mL。

操作步骤

1.在 5 mL 离心管中加入 1.0 mL 试剂 I,0.5mL 试剂 II,37℃ 预热 5 min。

2.加入 0.5 mL 待测样品,混匀,37℃ 反应 15min 后,加入 2.0 mL 试剂 III 终止反应。

3.在 400 nm 处测定样品吸光度。

4.交换试剂 III 和待测样品的添加顺序,测定空白吸光度。