葡萄糖脱氢酶/9028-53-9


中文:葡萄糖脱氢酶
英文:GDH
CAS:9028-53-9
分子式:EC1.1.1.119
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH6802-01
规格:5ku
中文同义词:葡萄糖脱 氢酶;葡萄糖脱氢酶,葡萄糖脱氢酶;
英文同义词:β-D-Glucose:NAD[P]+ 1-oxidoreductase,
技术指标

外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度: ≥90%;比活性: ≥160 U/mg酶粉;葡萄糖脱氢酶:(NAD)≤0.02%;己糖激酶: ≤0.02%; α-葡萄糖苷酶: ≤0.02%

酶学性质

来源:微生物;分类: EC 1.1.5.9; 分子量: 66 kDa(SDS-PAGE);等电点 :5.04; Km值:7.45×10-2 M(D-glucose);抑制剂:Ag+,Cu2+,SDS;最适pH:7.0;最适温度:50-55℃;pH稳定性:5.0-9.0(25℃,16 h).热稳定性50℃以下稳定(pH 7.0,30 min);稳定性: -25~-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性;


酶活定义

单位酶活定义为在下述条件下每分钟消耗1μmol DCIP所需的酶量。

试剂准备

试剂I:0.1M pH 7.0磷酸钾缓冲液(用水溶解)。

试剂II:2M D-葡萄糖溶液(用水溶解)。

试剂III:1.8mM DCIP(用水溶解,现配现用)。

试剂IV:30 mM PMS(用水溶解)。

酶稀释液:0.1M pH 6.0磷酸钾缓冲液,含0.1%BSA。

待测酶液:用酶稀释液将酶液稀释至0.1-0.9U/mL。

操作步骤

1.在3 mL比色皿中加入2.05mL试剂I,0.6mL试剂II,0.15 mL试剂III,37℃预热5min。

2.加入0.1 mL试剂IV,混匀。

3.加入0.1 mL待测酶液,混匀。

4.在600 nm处测定37℃下,1分钟内吸光度的变化率ΔAs。

*用酶稀释液代替待测样品,其它步骤相同,测定1 min内的吸光度变化ΔAb。ΔA=ΔAs-ΔAb