胱硫醚合成酶/9023-99-8


中文:胱硫醚合成酶
英文:cystathionine β-synthase
CAS:9023-99-8
分子式:EC 4.2.1.22
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH4001-01
规格:5ku
中文同义词:胱硫醚β合成酶(CBS)
英文同义词:cystathionine β-synthase
技术指标

外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性≥8 U/mg(酶粉);葡萄糖-6-磷酸脱氢酶≤0.01%;乳酸脱氢酶≤0.01%;

酶学性质

来源:微生物;分类:EC 4.2.1.22;分子量:51 kDa(SDS-PAGE);等电点5.4;Km值:8.0×10-4 M(L-Serine),1.6×10-4 M;(L-Homocysteine);抑制剂:不受NaN3抑制;最适pH:8.0;最适温度:40℃;pH稳定性:6.0-10.0(25℃,16 h);热稳定性45℃以下稳定(pH 8.0,30 min);稳定性:-25~-15℃静置保存12个月保持90%以上活性;稳定剂:Triton X-100;

用途:用于酶法检测同型半胱氨酸。

酶活定义

在下述条件下,每分钟合成1μmol胱硫醚所需的酶量。

试剂准备

试剂I:在50 mM pH 8.0 PBS缓冲液中,加入L-丝氨酸至终浓度10 mM,DL-同型半胱氨酸至终浓度2 mM,S-腺苷甲硫氨酸至终浓度0.38 mM,磷酸吡多醛至终浓度0.25 mM,DTT至终浓度1 mM,CBL至终浓度5 U/mL,NADH至终浓度0.2 mM,LDH至终浓度5U/mL。

试剂II:50 mM pH 8.0 PBS缓冲液。

待测样品:用试剂II将酶液稀释至0.8-2.4U/mL。

操作步骤

1.在1 mL比色皿中加入1 mL试剂I,37℃水浴5 min。

2.加入20μL待测样品,混匀。

3.37℃反应,340 nm测定1 min内吸光度变化ΔAs。

*用试剂II代替待测样品,其它步骤相同,测定1 min内的吸光度变化ΔAb。ΔA=ΔAs-ΔAb