乳酸脱氢酶/9001-60-9


中文:乳酸脱氢酶
英文:LDH
CAS:9001-60-9
分子式:C3H5O3
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH1701-01
规格:10ku
中文同义词:乳酸脱氢酶(硫酸铵悬浮液), L-乳酸脱氢酶,乳酸脱氢酶(兔肌),
英文同义词:Lactate Dehydrogenase,
技术指标:

外观:白色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥200 U/mg酶粉;NADH/NADPH 氧化酶:≤0.01%;苹果酸脱氢酶:≤0.005%;谷氨酸脱氢酶:≤0.003%;丙酮酸激酶:≤0.03%

酶学性质

来源: 微生物;分类: EC 1.1.1.28;分子量: 45 kDa(SDS-PAGE);等电点: 4.5;Km值:2.2×10-6 M (丙酮酸);抑制剂:Ag+,Hg2+;最适pH:6.5-7.0;最适温度:45℃;pH稳定性 5.5-10.0 (25℃,16 h);热稳定性 50℃ 以下稳定 (pH 7.0,30 min);稳定性:-25~-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性;保护剂:BSA。

用途:用于谷草转氨酶,谷丙转氨酶等试剂的研发和大量配制。

酶活定义

单位酶活定义为在下述条件下,每分钟氧化 1μmol NADH 所需的酶量。

试剂准备

试剂I:称取 0.04 g 丙酮酸钠,用 0.1 M,pH7.7 Tris-HCl 缓冲液溶解并定容至 100 mL。

试剂II:称取 2.11 g CAPS,用 80 mL 水溶解,用 NaOH 调节 pH 至 9.7,加入120 mg NADH,用双蒸水定容至 100 mL。

酶稀释液:10 mM,pH 7.0 磷酸钾缓冲液,并加入 BSA 至终浓度 0.1%。

样品:用预冷的酶稀释液将酶稀释至 1-2U/mL。

操作步骤

1. 向1 mL比色皿中加入1 mL试剂I,20μL待测样品,混匀。

2. 将反应混合物在37℃预热5 min。

3. 向反应混合物中加入 0.2 mL 试剂II,混匀,37℃ 反应,并用分光光度计在 340 nm下,记录 1 min 内的吸光度变化(ΔAs)

*用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb